ELISA-test: vad är principen?

ELISA-test: vad är principen?

Definition: vad är ELISA-testet?

Den länkade enzymimmunoabsorptionsanalystekniken – på engelska Enzyme-Linked Immuno Assay – eller ELISA-test är ett immunologiskt test som möjliggör detektering eller analys av molekyler i ett biologiskt prov. Den konceptualiserades och utvecklades av två svenska forskare, Peter Perlmann och Eva Engvall vid Stockholms universitet 1971.

Molekylerna som analyseras med ELISA-metoden är i allmänhet proteiner. Och provtyper inkluderar flytande biologiska material - plasma, serum, urin, svett -, cellodlingsmedia eller ett rekombinant protein - protein producerat av en cell vars genetiska material har förändrats genom genetisk rekombination - renat till lösning.

ELISA-testet används huvudsakligen inom immunologi för att detektera och/eller mäta förekomsten av proteiner, antikroppar eller antigener i ett prov. Detta serologiska test detekterar särskilt de antikroppar som produceras av kroppen som svar på viral kontaminering.

Principen för ELISA-testet för infektionssjukdomar

Användningen av antikroppar för diagnos av infektionssjukdomar representerar en specifik och snabb metod. ELISA-tekniken är en immuno-enzymatisk teknik som gör det möjligt att utifrån ett biologiskt prov visualisera reaktionerna mellan ett antigen – en kropp som anses främmande av den levande organismen – och en antikropp med hjälp av en färgreaktion producerad av en enzymmarkör – i allmänhet alkaliskt fosfatas och peroxidas – tidigare fäst vid antikroppen. Färgreaktionen bekräftar identifieringen av den isolerade bakterien eller närvaron av det önskade viruset och färgens intensitet ger en indikation på mängden antigener eller antikroppar i det givna provet.

De olika typerna av ELISA-tester

Det finns fyra huvudtyper av ELISA-test:

  • ELISA direkt, gör det möjligt att detektera eller mäta antikroppar. Den använder bara en primär antikropp;
  • ELISA indirekt, den mest använda, gör det också möjligt att detektera eller analysera antikroppar. Den använder en sekundär antikropp som ger den bättre känslighet än direkt ELISA;
  • ELISA i tävling, tillåter dosering av antigener. Den produceras av konkurrens om bindningar och använder inte ett enzym;
  • ELISA «i smörgås», tillåter dosering av antigener. Denna teknik används ofta inom forskning.

Använder ELISA-testet

ELISA-testet används för:

  • Hitta och mät antikroppar inom serologi för diagnos av infektionssjukdomar: virologi, parasitologi, bakteriologi, etc.;
  • Dosera proteiner i låga koncentrationer: specifika doser av vissa plasmaproteiner (immunoglobulin E (IgE), ferritin, proteinhormoner, etc.), tumörmarkörer, etc.;
  • Dosera små molekyler: steroidhormoner, sköldkörtelhormoner, droger ...

De vanligaste fallen: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergier, graviditet

ELISA-testet används särskilt för att diagnostisera många infektionssjukdomar:

Sexuellt överförbara sjukdomar (STD)

Inklusive hepatit, syfilis, klamydia och HIV. Det rekommenderas av hälsomyndigheter och är det viktigaste screeningtestet för AIDS: det visar närvaron av anti-HIV-antikroppar och p24-antigenet sex veckor efter infektion.

Regionala eller endemiska sjukdomar

Gul feber, Marburg-virussjukdom (MVM), Ladengue, borrelia, Chikungunya, Rift Valley-feber, Ebola, Lassa-feber, etc.

Covid-19

För att utföras mer än 2 till 3 veckor efter symptomdebut gör ELISA-testet det möjligt att på mindre än en timme identifiera förekomsten av anti-SARS-CoV-2-antikroppar.

Virala patogener som orsakar prenatala infektioner

Toxoplasmos, röda hund, cytomegalovirus, herpes simplex till exempel.

Andra fall

Men han har också hittat tillämpningar för upptäckt:

  • Graviditeter;
  • Autoimmuna sjukdomar;
  • Livsmedelsallergener: den kvantitativa bestämningen av totala immunglobuliner E (IgE) hjälper till vid bedömning och behandling av allergier;
  • Hormonella störningar;
  • Tumörmarkörer;
  • Växtvirus;
  • Och många fler

Covid-19-testets tillförlitlighet

Som en del av upptäckten av anti-SARS-CoV-2-antikroppar, bekräftar en pilotstudie som genomfördes i augusti 2020 av Institut Pasteur, CNRS, Inserm och University of Paris tillförlitligheten av ELISA-testet: båda ELISA-testerna användes hela N-proteinet i SARS-CoV-2 (ELISA N) eller den extracellulära domänen av virusspiken (S) som målantigener. Denna teknik skulle göra det möjligt att identifiera antikroppar i mer än 90 % av fallen, med en mycket låg andel falskt positiva på 1 %.

Pris och ersättning för ELISA-testet

Genomförda i analyslaboratorier på recept kostar Elisa-tester cirka 10 euro och ersätts med 100 % av sjukförsäkringen.

Genomförs i gratis informations-, screening- och diagnostiska center (CeGIDD), de kan vara gratis för HIV och SARS-CoV-2.

Kommentera uppropet