Diagnosen akromegali är ganska lätt (men bara när du tänker på det), eftersom det innebär att man tar ett blodprov för att fastställa nivån av GH och IGF-1. Vid akromegali finns en hög nivå av IGF-1 och GH, med vetskapen om att utsöndringen av GH normalt är intermittent, men att den vid akromegali alltid är hög eftersom den inte längre är reglerad. Den definitiva laboratoriediagnosen baseras på glukostestet. Eftersom glukos normalt minskar utsöndringen av GH, gör oral administrering av glukos det möjligt att genom successiva blodprov upptäcka att utsöndringen av tillväxthormon förblir hög vid akromegali.

När hypersekretionen av GH har bekräftats är det sedan nödvändigt att hitta dess ursprung. Idag är guldstandarden en MR av hjärnan som kan visa en hypofystumör. I mycket sällsynta fall är det en tumör som ligger någon annanstans (oftast i hjärnan, lungan eller bukspottkörteln) som utsöndrar ett annat hormon som verkar på hypofysen, GHRH, som stimulerar produktionen av GH. En mer omfattande bedömning görs sedan för att hitta ursprunget till denna onormala sekretion.